液相色譜熒光檢測法測定環(huán)境水中苯胺和苯酚 

     苯胺是制造染料、藥物的主要原料,進入人體后可造成急性中毒，引起高鐵血紅蛋白血癥和肝、腎及皮膚損害。也可造成慢性中毒，長期低濃度接觸可引起中毒性肝病。測定這2種物質(zhì)的方法有分光光度法、熒光光度法 、可變角熒光法和液相色譜紫外檢測法等。本文以液相色譜分離,以高選擇性的熒光檢測器進行檢測,通過選用合適的分離條件,并采用檢測波長的時間切換,樣品不需要前處理,可對苯胺和苯酚同時測定,所用方法未見報道。方法可直接對環(huán)境水體中的苯胺和苯酚同時進行分析。

一、實驗部分

1.儀器與試劑

（1）儀器：液相色譜系列（濟南精測電子科技有限公司）; 溶劑過濾系統(tǒng), 超聲波發(fā)生器

（2）試劑：甲醇為色譜純,苯胺、苯酚、KH2PO4、Na2HPO4等試劑均為AR級,實驗用水為去離子雙蒸水

2.實驗方法

   苯胺和苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：將新蒸餾的苯胺和苯酚用去離子雙蒸水分別配制成1.0mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液,避光冷藏。使用時分別稀釋或者配制成1∶1混合標(biāo)準(zhǔn)溶液后稀釋至所需質(zhì)量濃度。

   樣品測定：分別移取1.00mg/mL的苯胺和苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲備液,配制成質(zhì)量濃度分別為0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,5.0μg/mL系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,以選定的色譜條件進樣測定,分別繪制苯胺和苯酚標(biāo)準(zhǔn)曲線。水樣去除懸浮物(如出現(xiàn)混濁,離心取清液)進樣測定,外標(biāo)法定量,進樣量均為20μL。

二、結(jié)果與討論

1.分離條件選擇

    苯胺和苯酚在不同pH下的熒光強度各不相 同,其原因主要是苯胺和苯酚的化學(xué)結(jié)構(gòu)、離解作 用對熒光性質(zhì)有影響。經(jīng)使用多種流動相,并調(diào)整 為不同pH試驗,以pH6.87磷酸鹽緩沖液+甲醇(50∶50)為流動相,苯胺和苯酚均有較強的熒光。通過與ODS柱對比分析,使用EclipseXDB2C8柱,苯胺和苯酚的分離效果好、色譜峰對稱。標(biāo)準(zhǔn)樣品及工業(yè)廢水樣品的色譜圖見圖1

2.水樣分析

    按試驗方法對自來水、城市河水及化工廠未處理廢水中的苯胺和苯酚進行了測定,并與熒光光度法測定結(jié)果作比較。結(jié)果見表1。